一种美罗培南原料药、 其制备方法及包含其的药物组合物 技术领域

本发明属于制药领域， 具体而言， 本发明涉及一种美罗培南原料药、 其制备方法、 以及包含该美罗培南原料药的药物组合物。 背景技术

美罗培南 （Meropenem ), 化学名为（-)-(4R,5S,6S)-3-[(3S,5S)-5- (二曱基 胺酰基 )-3-吡咯烷]硫 -6-[(lR)-l-羟乙基 ]-4-曱基 -7-氧 -1-氮杂双环 [3.2.0]-庚 -2- 烯 -2-羧酸三水合物， 是一种碳青霉烯类抗生素， 具有广谱抗菌性并且可供 注射， 用于治疗多种不同的感染， 包括脑膜炎及肺炎， 其在常态下是以三 水合物的形式存在的， CAS登记号为 【 119478 ~ 56 ~ 7】， 具体结构式如式 ( I ) 所示。

( I ) 原料药英文名为 API (Active Pharmaceutical Ingredient) ,指用于生产各 类制剂的原料药物，是制剂中的有效成份。原 料药在 ICH Q7A中的完善定 义为： 旨在用于药品制造中的任何一种物质或物质的 混合物， 而且在用于 制药时， 成为药品的一种活性成分。 此种物质在疾病的诊断， 治疗， 症状 緩解， 处理或疾病的预防中有药理活性或其他直接作 用， 或者能影响机体 的功能或结构。

中国药典 2010年版二部 606页关于美罗培南（Meropenem )的标准中 对有关物质进行了规定： 主峰前和后的最大杂质峰面积均不得大于对照 溶 液主峰面积的 0.6倍（0.3% ),其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰 面积的 0.2倍（ 0.1% ), 各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积 的 2 倍（ 1.0% )。 其中残留溶剂规定： 检测丙酮、 乙腈、 二氯曱烷、 乙酸乙酯 与四氢呋喃符合规定， 中国药典 2010年版二部附录覆 P残留溶剂测定法 附表 1 药品中常见的残留溶剂及限度中规定： 丙酮检测限度为 0.5% ( 5000ppm ); 乙腈为 0.041% ( 410ppm ); 二氯曱烷为 0.06% ( 600ppm ); 乙酸乙酯的检测限度为 0.5% ( 5000ppm ); THF 的检测限度为 0.072% ( 720ppm )。

目前公开文献报道的美罗培南的精制方法， 如 US4888344 实施例 1 中公开了美罗培南三水合物晶体的制备方法， 该方法包括将美罗培南粗品 于 30°C溶于水中， 水浴冷却， 析出少量晶体， 加入丙酮， 搅拌 1小时， 过 滤得到晶体， 用丙酮洗涤， 减压室温干燥 2小时得到美罗培南三水合物晶 体。 这种精制方法收率较高， 但丙酮残留高， 可能可以达到中国药典 2010 年版二部附录残留溶剂测定法中规定药品中丙 酮不超过 0.5%的检测限度。 但美国药典 USP32-NF27中美罗培南三水合物标准中对溶剂残� �有及其严 格的要求， 其中丙酮残留不得高于 0.05%, 这种精制方法一般很难达到。 而且丙酮属于公安机关管制类型中的易制毒第 三类、 易制爆类， 虽然丙酮 属于三类溶剂， 急性或短期研究显示， 这些溶剂毒性较低， 基因毒性研究 结果呈阴性， 但尚无这些溶剂的长期毒性或致癌性的数据， 且它对人体具 有肝毒性， 长期使用丙酮残留高的注射剂无疑对患者的健 康极其不利， 如 有些癌症患者尿样丙酮水平会异常升高。

US2009264643 公开了一种美罗培南三水合物的精制方法， 其中涉及 先后加入氨水、 曱酸调节 pH值， 然后用四氢呋喃结晶的工艺。 此方法比 较繁瑣， 而且中国药典 2010年版二部附录残留溶剂测定法中规定药品� � THF 的检测限度为 0.072%, 这种精制方法一般艮难达到。 并且四氢呋喃 属于二类溶剂， 属于无基因毒性但有动物致癌性的溶剂， 它健康危害有： 高浓度吸入后可出现头晕、 头痛、 胸闷、 胸痛、 咳嗽、 乏力、 胃痛、 口干、 恶心、 呕吐等症状， 可伴有眼刺激症状， 部分患者可发生肝功能障碍。 高 剂量或反复接触， 可出现肝脂肪浸润及细胞溶解； 长期接触会导致失去性 功能、生育能力，或肾疾病。所以应避免在工 艺的最后一步使用，否则 THF 残留太高将严重威胁美罗培南注射剂的安全。

CN201010232062.7公开了一种美罗培南三水合物结� �的制备方法，其 完全在水溶液中结晶， 滤液加有机溶剂回收美罗培南。 这种方法制得的美 罗培南三水合物结晶中各种有机溶剂残留低于 0.05% ,但需要分二步进行， 收率不高， 而且滤液加有机溶剂回收美罗培南就将大大增 加有机溶剂的使 用量， 不利于环保， 也不利于降低成本。

CN201110218567.2公开了一种美罗培南的制备方法� �其包括将美罗培 南粗品溶解在 10%氢氧化钠水中， 活性炭处理后过滤、 析晶， 再加乙酸乙 酯回收美罗培南。 该方法也需要分二步进行， 收率不高； 而且滤液加乙酸 乙酯回收美罗培南也将大大增加乙酸乙酯的使 用量， 不利于环保， 也不利 于降低成本。 此外 Yutaka Takeuchi等人于 Chem. Pharm. Bull.43(4)689 - 692(1995)中记载了美罗培南在酸性和碱性条件下 比中性环境更不稳定，并 且该文献 P690显示等量的碳酸氢钠、 美罗培南水溶液冻干得到美罗培南 钠盐， 400mg美罗培南钠盐溶解在 lml水中维持在 30°C , 用 HPLC监控， 可以发现 6小时后 HPLC峰面积比为： 美罗培南 47%, 降解产物 A 11%, 降解产物 B 38% , 相比碱性较弱的碳酸氢钠， pH大约为 14.3的 10%氢氧 化钠溶液无疑会使美罗培南的降解更加严重。 Yutaka Takeuchi等人于 The Journal of Antibiotics Vol.46 No.5 P829也记载了在酸性（ H < 2 )和碱性（ H > 13 )环境下， 美罗培南立即水解， 主要降解产物（指开环产物 A )生成。 因此这种将美罗培南粗品溶解在强碱性的 10 %氢氧化钠水中重结晶的方 法， 非但不能实现美罗培南的提纯目的而且会增大 美罗培南的杂质。 所以 其实施例声称得到的美罗培南经中国药典 2010年版二部美罗培南有关物 质检测， 单一最大杂质 0.03%, 总杂质 0.13% , 其可信度值得怀疑， 而且 对照中国药典 2010年版二部美罗培南有关物质检测标准，其� �有提及 "主 峰前和后的最大杂质" 含量多少， 我们无法确定 "单一最大杂质"及 "总 杂质" 是否包括 "主峰前和后的最大杂质"， 以至于无法清晰地获知其中 美罗培南杂质的状况。

在美罗培南或任何活性药物成分（API ) 中的杂质为不需要的， 并且 在极端情况下， 甚至可能对正接受含 API的剂型治疗的患者有害。 例如国 家食品药品监管局官方网站发布的 《2011年药品不良反应监测年度报告》 显示， 化学药品中抗感染类在总不良反应报告和严重 不良反应报告中均排 首位， 占比高达 51.2%。 这与杂质、 溶剂残留控制不严， 有些抗生素存在 不明杂质， 长期储存过程中质量不稳定都有一定的关系， 所以， 迫切需要 提供一种杂质含量更低、 杂质状况清晰、 溶剂残留更低、 质量稳定、 不良 反应小的美罗培南原料及制剂组合物。

美罗培南的热稳定性差， 大生产过程中母液量大， 主要为水， 如果将 母液直接加热， 高温真空浓缩， 长时间处于高温状态将加速美罗培南的降 解， 这样回收的母液杂质量大， 因此这种回收方法没有实际应用价值。 如 果釆用加入全新的有机溶剂进行回收的方式， 由于水量大， 因此需要加入 的有机溶剂量也艮大， 从环保方面、 成本方面考虑也都是不可取的。

纳滤膜分离技术（英文名为 Nanofiltration, 简称 NF , 中文译为 "纳 滤"） 是允许溶剂分子或某些低分子量溶质或低价离 子透过的一种功能性 过滤技术。 纳滤膜为半透膜， 其存在着纳米级的细孔， 且截留率大于 95 %的最小分子约为 lnm, 截留有机物的分子量大约为 150 ~ 500左右， 截 留溶解性盐的能力为 2 ~ 98%之间， 对单价阴离子盐溶液的脱盐低于高价 阴离子盐溶液，主要用于去除地表水的有机物 和色度，脱除地下水的硬度， 部分去除溶解性盐， 浓缩果汁等。

目前将美罗培南原料药制备过程产生的反应液 经过纳滤浓缩后进入 下一批美罗培南粗品的制备的应用还未见报道 。 如果直接将美罗培南结晶 液纳滤浓缩， 纳滤过程是否会对含大量美罗培南的结晶液稳 定性产生影 响， 尚需要考察。 并且， 由于美罗培南浓度大， 体积不能浓缩到很小， 否 则晶体会析出造成纳滤膜堵塞， 这样就需要再加入大量有机溶剂析晶， 很 难得到有机溶剂残留低的美罗培南原料药。 发明内容

经过大量实验， 本申请人惊喜地发现， 美罗培南粗品如经纯水精制， 除美罗培南原料药外， 还可以得到过滤母液， 其为含美罗培南 1 ~ 2%的水 溶液， 此溶液经过纳滤膜浓缩后水量大大减少， 纳滤浓缩前后重量比为 5: 1 - 15: 1 , 浓缩后的美罗培南含量为 5 ~ 20%, 浓度大大提高。

同时， 由于美罗培南粗品的生产中需要加入大量有机 溶剂到结晶体系 中以析出美罗培南粗品， 因此过滤除去美罗培南粗品后的母液含大量有 机 溶剂， 其中有机溶剂体积之和与水的体积之比大约为 3: 1 ~ 6: 1 , 这些有机 溶剂主要为丙酮、 四氢呋喃、 异丙醇、 曱醇、 乙醇、 曱基乙基酮的一种或 多种。 这种母液作为废液浪费太大， 如回收则成本也会 4艮高。 如果将纳滤 膜浓缩后的浓缩液加入此主要为有机溶剂的粗 品母液中， 则可直接结晶得 到下一批美罗培南粗品， 从而使有机溶剂得到充分利用。

或者， 可以将纳滤膜浓缩后的浓缩液加入到后续粗品 制备中氢化过滤 后未析出粗品的母液， 按常规方法滴加有机溶剂， 如丙酮、 四氢呋喃、 异 丙醇、 曱醇、 乙醇、 曱基乙基酮的一种或多种， 调整有机溶剂体积之和与 水的体积之比大约为 3: 1 ~ 6: 1 , 同样可结晶得到美罗培南粗品。

基于上述发现， 本发明的一个目的是通过对原料药有效成分美 罗培南 进行含量测定，对主要杂质 A和杂质 B进行物质确定和含量分析，对残留 溶剂严格控制， 提供一种美罗培南原料药， 该原料药区别于现有技术， 纯 度高、 杂质状况清晰、 溶媒残留低、 长期储存稳定性好、 质量控制指标能 够保证产品有效安全。

本发明的另一个目的是提供一种美罗培南原料 药的制备方法， 该方法 包括， 将美罗培南粗品经精制得到美罗培南原料药和 含低浓度美罗培南的 溶液， 所得溶液经过纳滤膜浓缩后进入后续美罗培南 粗品的制备。 该方法 工艺简单、 紧凑、 可控， 同时收率高、 成本低， 具有巨大的经济优势。

本发明的再一个目的是提供一种美罗培南药物 组合物， 该药物组合物 以本发明提供的美罗培南原料药为活性成分， 具有很好的稳定性。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的。

一方面， 本发明提供一种美罗培南原料药， 以重量百分比计， 所述原 料药中美罗培南的含量为 98.5% ~ 101.0%, 以无水物计算； 所述原料药的 有关物质中杂质 A、 杂质 B 均不大于 0.25%; 任何未知单个杂质不大于 0.05%; 除 A和 B外其它杂质总和不大于 0.2%; 丙酮残留不大于 400ppm, 优选不大于 100ppm。

其中杂质 A为：

另一方面， 本发明还提供一种美罗培南原料药的制备方法 ， 所述方法 包括： 将美罗培南粗品经精制、 过滤得到母液 3及美罗培南原料药， 母液 3经过纳滤膜浓缩后， 将所得浓缩液加入到后续粗品制备中氢化、 过滤后 已析出粗品的母液（母液 2 ) 或未析出粗品的母液（母液 1 ) 中， 结晶得 到美罗培南粗品。

需要指出的是， 本发明所述的美罗培南粗品及下文涉及的美罗 培南晶 种是指具有通式 （I ) 的化合物：

( I ) 在美罗培南的制备中， 美罗培南粗品一般由保护美罗培南 （la ) 氢化 制备得到， 为未精制美罗培南 （化合物 I ), 反应式如下：

反应过程一般为： 将保护美罗培南 （或者保护美罗培南浓缩液）、 反 应溶剂、 催化剂 （如钯碳）加入到高压氢化釜中， 除去空气， 通入氢气反 应， 反应毕， 过滤回收钯碳， 得到未析出粗品的母液； 此母液为本发明所 述未析出粗品的母液， 简称母液 1；

此母液 1中加入有机溶剂， 控制温度搅拌析晶， 过滤， 得母液 2及美 罗培南粗品； 此母液 2为本发明所述已析出粗品的母液， 简称母液 2。

美罗培南粗品经精制、 过滤得到母液 3及美罗培南原料药； 母液 3经 过纳滤浓缩得到纳滤浓缩液， 将其加入后续粗品制备中的母液 1或母液 2 中， 再一起结晶制备得到美罗培南粗品。

所述制备方法的工艺流程见附图 10。

这个过程在控制美罗培南粗品、 美罗培南原料药质量合格的条件下， 可以循环往复， 一直套用下去， 不仅能够大大地减少有机溶剂的使用量， 还能最大限度地回收母液 3中的美罗培南， 极大提高了产品收率， 降低了 生产成本。

所述美罗培南粗品及晶种优选按照本发明下文 所述方法制得， 也可以 通过现有技术中制备美罗培南的任何方法制备 ， 如 CN1960992A 或 CN200610083362.7中制备美罗培南的方法。

优选地， 在该方法中， 在 5 X 10 ⁵ Pa ~ 20 X 10 ⁵ Pa、 优选 15 x 10 ⁵ Pa ~ 20 χ 10 ⁵ Pa的压力和 5 ~ 35 °C、优选 10 ~ 25 °C的温度下进行母液的纳滤浓缩。

并且， 所述母液与所得浓缩液的重量比为 5: 1 ~ 15: 1 , 优选 7: 1 ~ 10: 1 ; 所得浓缩液中美罗培南的含量为 5 ~ 20%, 优选 7 ~ 15%。

此外， 所述结晶得到美罗培南粗品的体系中有机溶剂 的总体积与水的 体积比为 3: 1 ~ 6: 1； 有机溶剂选自丙酮、 四氢呋喃、 异丙醇、 曱醇、 乙醇 和曱基乙基酮中的一种或多种。

本文所述的纳滤浓缩优选按照本发明所述方法 进行， 也可应用现有技 术任何方法进行。 所述膜浓缩可以通过聚四氟乙烯纳滤膜、 聚苯乙烯纳滤 膜、 聚醚砜树脂纳滤膜、 复合膜、 醋酸纤维素膜、 聚酰胺膜等进行浓缩， 纳滤浓缩分离设备可购买。 纳滤膜截留有机物的分子量为 150 ~ 500左右。 美罗培南三水合物的分子量为 437.5 , 无水美罗培南分子量为 383.5 , 因此 溶剂分子及水分子可以通过， 而美罗培南被截留下来， 满足这个条件的纳 滤膜就可以应用。

纳滤浓缩后母液， 优选按照本发明方法加入到后续粗品制备中氢 化、 过滤后已析出粗品的母液（母液 2 )或未析出粗品的母液（母液 1 ), 结晶 得到美罗培南粗品。 也可直接加入到现有技术任何方法中的制备美 罗培南 粗品的反应液、 结晶液、 过滤后母液中， 同时结晶得到美罗培南粗品。 如 直接将纳滤浓缩液加入 CN1960992A实施例 3中氢化过滤后水溶液， 混合 液滴加四氢呋喃， 同时结晶得到美罗培南粗品； 或直接将纳滤浓缩液加入 CN200610083362.7的实施例 2中过滤完美罗培南（5.1g )的母液中， 直接 结晶得到美罗培南粗品； 或者直接将纳滤浓缩液加入有机溶剂单独结晶 回 收， 作为下一批美罗培南粗品。

另一方面， 本发明还提供一种美罗培南原料药的制备方法 ， 所述方法 包括以下步骤：

1 )使美罗培南粗品溶解在温度为 50°C ~ 80°C的水中， 再将所得溶液 的温度降至 10°C ~ 30°C得溶液 I；

2 )将经步骤 1 )得到的溶液 I经活性炭脱色后过滤， 以得到滤液 II；

3 )将经步骤 2 )得到的滤液 II的温度降至 0°C ~ 20°C以结晶， 过滤后 得到母液 3和滤饼， 所述滤饼经洗晶、 干燥后得到美罗培南原料药； 以及

4 )将经步骤 3 )得到的母液 3通过纳滤浓缩后， 加入到下一批粗品制 备中氢化、 过滤后已析出或未析出粗品的母液， 结晶得到美罗培南粗品。

在本发明上述制备方法的步骤 1 ) 中， 以重量百分比计， 美罗培南粗 品中 C ₁₇ H ₂₅ N ₃ 0 ₅ S的含量不少于 92%, 按无水物计算； 杂质 A、 杂质 B均 不大于 0.8%; 任何未知单个杂质不大于 0.3%; 除 A和 B外其它杂质总和 不大于 3.0%。 其中所述杂质 A为:

所述杂质 B为:

优选地， 在本发明上述制备方法的步骤 1 ) 中， 以重量百分比计， 所 述美罗培南粗品中 C ₁₇ H ₂₅ N ₃ 0 ₅ S的含量不少于 95%, 以无水物计算； 杂质 A、 杂质 B均不大于 0.6%; 任何未知单个杂质不大于 0.3%; 除 A和 B外 其它杂质总和不大于 2.0%。

优选地， 步骤 1 ) 中所述使美罗培南粗品溶解在温度为 50°C ~ 80°C的 水中包括： 将所述美罗培南粗品加入到 10 ~ 20倍重量、 优选 15 ~ 20倍重 量的 5 ~ 20 °C的注射用水中， 搅拌混合均匀， 然后将所得混悬物加热到 50 °C ~ 80°C、 优选 60°C ~ 80°C溶解； 其中所述溶解的时间小于 4分钟， 优选 小于 1分钟。

溶解之后， 优选地， 将所得溶液的温度降至 10°C ~ 25°C ; 其中降温的 时间小于 4分钟， 优选小于 1分钟。

其中步骤 1 ) 中的温度升高和降低均可通过换热器进行， 例如中国专 利申请 CN201120235961.2 中所述的换热器。 优选釆用本发明的方法利用 换热器换热快速溶解并快速降温； 也可釆用任何可以达到快速溶解的方式 溶解美罗培南粗品， 釆用任何可以达到快速降温的方式将溶液降温 。

在本发明方法的步骤 2 ) 中， 溶液 I可以在 15°C ~ 25°C下经釆用美罗 培南粗品重量 1 ~ 20%的活性炭脱色 1 ~ 30分钟、优选 1 ~ 10分钟后过滤， 以得到滤液 II。

或者， 步骤 2 ) 中， 溶液通过活性炭过滤器在线过滤脱色。 优选釆用 本发明的方法进行活性炭处理， 该溶液也可釆用任何已知方式进行活性炭 处理， 所用的活性炭未作特别限制。

在本发明方法的步骤 3)中包括， 将滤液 II的温度降至 0°C ~5°C以结 晶， 并养晶 2 ~ 20小时， 优选 5 ~ 10小时； 过滤后得到母液 3和滤饼， 所 述滤饼用丙酮淋洗以洗晶，在 20°C ~40°C、优选 25°C ~30°C下真空干燥 3 ~ 10小时、 优选 5~6小时， 从而得到美罗培南原料药。 其中， 所述养晶优 选为搅拌养晶， 搅拌速度为 100 ~ 200转 /分钟， 优选 110 ~ 130转 /分钟。 本发明的养晶时间是指晶体生长时间， 步骤 3) 所述养晶时间为加入晶种 析晶至过滤之间的那段晶体生长的时间。

步骤 3)的析晶过程中可添加或不添加晶种， 优选添加晶种。 优选地， 步骤 3)还包括， 在结晶前向步骤 2)得到的滤液 II中添加晶种； 其中添 加晶种的温度为 0°C ~20°C, 优选 0°C ~5°C; 添加的晶种与美罗培南粗品 的质量比为 1%:1 ~ 10%:1, 优选 1%:1 ~2%:1。

更优选地， 步骤 3 ) 中在结晶前， 取滤液 II的 1% ~ 10% (重量比）， 向其中加入有机溶剂结晶形成晶种，将所得晶 种加入到剩余的滤液 II中以 进行结晶 （如在结晶罐中）； 其中， 所述有机溶剂选自丙酮、 四氢呋喃、 异丙醇、 曱醇、 乙醇和曱基乙基酮中的一种或多种， 优选丙酮和 /或四氢呋 喃； 所述部分滤液 II与有机溶剂的重量 （kg) ：体积 （L) 比为 1:2 ~ 1:6, 晶种制备温度为 5°C ~20°C, 优选 10°C ~15°C。

在本发明方法的步骤 4) 中， 在 5 X 10 ⁵ Pa~20 X 10 ⁵ Pa、 优选 15 x 10 ⁵ Pa ~ 20 χ 10 ⁵ Pa的压力和 5 ~ 35°C、 优选 10 ~ 25 °C的温度下进行母液 3的 纳滤浓缩，使得所述母液 3与所得浓缩液的重量比为 5:1 ~ 15:1,优选 7:1 ~ 10:1; 所得浓缩液中美罗培南含量为 5 ~ 20重量％, 优选 7~15重量％。

优选地， 步骤 4) 中所述结晶得到美罗培南粗品的体系中有机溶 剂的 总体积与水的体积比为 3:1 ~6:1； 有机溶剂选自丙酮、 四氢呋喃、 异丙醇、 曱醇、 乙醇和曱基乙基酮中的一种或多种； 优选地， 结晶温度为 5°C ~15 °C。

进一步优选地， 所述氢化、 过滤后已析出粗品的母液（母液 2) 或未 析出粗品的母液（母液 1) 为通过下述方法制备美罗培南粗品过程中的母 液 1和母液 2;

将保护美罗培南（或者保护美罗培南浓缩液） 、 THF、 水、 3,5,-二曱基 吡啶、 10%钯碳一并加入到高压反应釜中， 除去空气， 通入氢气， 室温反 应毕， 过滤洗涤回收钯碳， 得到未析出粗品的母液， 此母液可作为未析出 粗品的母液用， 简称母液 1； 此母液中加入有机溶剂， 控制温度 10-15 °C搅拌， 过滤， 洗涤， 产品 干燥， 得美罗培南 （化合物 I )粗品； 母液为已析出粗品的母液， 此母液 可作为已析出粗品的母液用， 简称母液 2。

所述有机溶剂选自四氢呋喃、 丙酮、 异丙醇、 曱醇、 乙醇、 曱基乙基 酮的一种或多种； 优选四氢呋喃、 丙酮； 优选地， 母液 2中有机溶剂体积 之和与水的体积比为 3: 1 ~ 6: 1。

根据上述方法制备得到的美罗培南原料药中， 美罗培南的含量为 98.5% ~ 101.0%, 以无水物计算； 所述原料药的有关物质中杂质 A、 杂质 B均不大于 0.25%; 任何未知单个杂质不大于 0.05%; 除 A和 B外其它杂 质总和不大于 0.2%; 丙酮残留不大于 400ppm, 优选不大于 lOOppm;

其中杂质 A为：

杂质 B为:

再一方面， 本发明提供了一种美罗培南药物组合物， 该药物组合物包 含本发明提供的美罗培南原料药和药学上可接 受的辅料； 优选地， 该辅料 为无菌碳酸钠， 其中美罗培南原料药与无菌碳酸钠的重量比为 1000: 195 ~ 1000: 222, 优选 1000:208; 优选地， 所述药物组合物为注射剂。

在所述美罗培南药物组合物中， 所述原料药中美罗培南的含量为 98.5% ~ 101.0%, 以无水物计算； 所述原料药的有关物质中杂质 A、 杂质 B均不大于 0.25%; 任何未知单个杂质不大于 0.05%; 除 A和 B外其它杂 质总和不大于 0.2%; 丙酮残留不大于 400ppm, 优选不大于 100ppm。

本发明还提供该注射用的美罗培南药物组合物 的制备方法， 所述方法 包括： 将无菌美罗培南原料药、 无菌碳酸钠粉碎， 检测符合无菌及粒度要 求， 按照美罗培南原料药与无菌碳酸钠的重量比为 1000: 195 ~ 1000: 222, 釆用高效混合机混合均勾， 将包装容器进行无菌处理， 灌装， 按照美国药 典 USP32-NF27注射用美罗培南项下方法检测合格， 包装入库。

本发明提供的注射用的美罗培南药物组合物， 具有更好的稳定性， 长 期储存后澄清度与颜色依然符合要求， 能够保证药品的安全、 有效。

在不脱离本发明构思的前提下， 本发明可以进行任何可能的变化或替 换， 均属于本发明的保护范围。

未作特别说明的话， 本发明检测方法中含量测定项、 有关物质项、 残 留溶剂项， 均按照美国药典 USP32-NF27中美罗培南 （ Meropenem ) 项下 的方法进行,即本发明提供的美罗培南原料药� �所述原料药中美罗培南的含 量为 98.5% ~ 101.0%, 以无水物计算； 所述原料药有关物质中： 任一两个 主要杂质 （杂质 A和杂质 B ) 不得大于 0.25%, 按无水物计算； 其他单个 杂质不得大于 0.05%, 按无水物计算； 其他杂质总和不得大于 0.2%。 丙酮 残留不大于 400ppm ( 0.04% ), 优选不大于 100ppm。 标准中任一两个主要 杂质指杂质 A和杂质 B, 杂质 A和杂质 B的相对保留时间 (以美罗培南 的保留时间约 6min为基准） 分别约为 0.5和 2.2。

其中杂质 A为：

单分子开环物（Mw: 401 ),可以为其异构体 A ₂ :

A ₂

杂质 B为一分子美罗培南与一分子开环物的二聚体� �Mw: 766 ), 也 可以为其异构体 B ₂ :

质量控制指标对能否保证产品的有效、 安全至关重要， 在美罗培南或 任何活性药物成分（API ) 中的杂质和残留溶剂为多余的， 只有对杂质进 行清晰地限定， 对超过鉴定限度的杂质研究鉴定该杂质的化学 结构， 才能 根据杂质的性质， 有针对性地制订杂质限度， 才能保证原料药及制剂的安 全、有效。 另外，原料药及制剂的稳定性出现问题也关系 到药物的安全性、 有效性不能得到保证， 所以原料药及制剂具有更好的稳定性也是更安 全、 有效的保证。

与现有技术相比， 本发明的有益效果在于：

1 ) 本发明提供的美罗培南原料药纯度高、 杂质状况清晰、 溶媒残留 低、 溶解性好、 质量控制指标能够保证产品有效、 安全。

2 ) 本发明提供的美罗培南原料药， 具有更好的稳定性， 长期储存后 澄清度与颜色依然符合药典要求， 引起副作用的可能性更小。

3 )本发明将美罗培南粗品经纯化水精制得到高� �质美罗培南原料药， 并且所得母液 3经过纳滤膜浓缩后加入到后续粗品制备中氢� �、 过滤后已 析出粗品的母液（母液 2 ) 或未析出粗品的母液（母液 1 ) 中， 结晶得到 美罗培南粗品。 取消了该母液单独回收步骤， 缩短了工时， 不仅能够大大 地减少有机溶剂的使用量， 还能最大限度地回收母液 3中的美罗培南， 极 大提高了产品收率， 显著降低了生产成本。

4 ) 本发明可在较低温度下， 较短时间内浓缩对热不稳定的美罗培南 溶液， 大大减少了美罗培南的分解， 纳滤浓缩过程易控， 温升很低， 可确 保产品在料液内不变质。

5 )从浓缩结果可知， 美罗培南的分解未被检测到； 废水液中美罗培 南残留未检出， 浓缩收率为 100%, 说明操作条件合适， 纳滤膜截留分离 效果较好， 适宜现有产品的分离。

6 ) 本发明工艺简单、 成本极低、 工艺紧凑、 控制简单， 所得美罗培 南原料药纯度高、 溶媒残留低、 溶解性好、 长期储存稳定性好， 适用于工 业大规模无菌的美罗培南原料药及药物制剂生 产。 附图说明

为了更好地理解本发明的本质， 下面结合附图， 通过对本发明较佳实 施方式的描述， 详细说明但不限制本发明。 其中：

图 1为杂质 A的核磁碳谱；

图 2为杂质 A的核磁氢谱；

图 3为杂质 A的红外分析图谱；

图 4为杂质 A的质谱图；

图 5为杂质 A的紫外吸收图谱；

图 6为杂质 B的核磁氢谱；

图 7为杂质 B的红外分析图谱；

图 8为杂质 B的质谱图；

图 9为杂质 B的紫外吸收图谱。

图 10为本发明制备方法工艺流程图 实施发明的最佳方式

以下各实施例中所使用的原料、 试剂、 溶剂和其它试验材料、 膜浓缩 分离设备， 均为可以通过商购获得。

保护美罗培南（式 la )或者保护美罗培南的浓缩液可由现有技术任� � 方法制得， 如 CN200610083362.7所示方法。

美罗培南粗品可以参照实施例 13 的方法制备， 也可以通过现有技术 中制备美罗培南的任何方法制备， 如 CN1960992A或 CN200610083362.7 中制备美罗培南的方法。

以重量百分比计， 所述美罗培南粗品中 C ₁₇ H ₂₅ N ₃ 0 ₅ S 的含量不少于 92%, 以无水物计算； 杂质 A、 杂质 B均不大于 0.8%; 任何未知单个杂质 不大于 0.3%; 除 A和 B外其它杂质总和不大于 3.0%。

未作特别说明的话， 本发明检测方法中含量测定项、 有关物质项、 残 留溶剂项均按照美国药典 USP32-NF27中美罗培南 （ Meropenem ) 项下的 方法进行。 稳定性考察试验按照美国药典 USP32-NF27方法进行。

所用仪器： 核磁共振（ Varian 300 ); 红外光语 ( NICOLET 170SX FT ~ IR );质谱（ API2000 );紫外光语（ Thermo Spectronic 300 );液质联用（ Agilent 1100 HPLC- AB API2000质谱 ); 制备液相色谱 ( Waters 2535 ); 元素分析 (德国 ELEMENTAR公司 vario EL元素分析仪）。 实施例 1

将美罗培南粗品 1kg加入到 20kg温度为 10°C的注射用水中， 搅拌混 合均勾， 将混悬物通过换热器瞬间加热到 80°C溶解， 并通过换热器迅速降 到常温 25 °C , 得溶液 I。

通过活性炭过滤器在线过滤脱色溶液 I, 得到滤液 II。

放出 210g的滤液 II, 设定温度为 10°C , 加入 1050ml丙酮， 搅拌 15 分钟后过滤得到晶种。 降温至 2°C , 将制得的晶种加入剩余的 20.8kg滤液 II中， 保持搅拌速度为 130转 /分钟， 养晶 8小时， 过滤， 得到母液 3 , 母 液 3进入下一步纳滤浓缩。

滤饼用丙酮淋洗， 滤饼真空 30°C干燥 5小时， 粉碎， 得到美罗培南原 料药 680g, 收率 68%。

其中美罗培南的含量为 99.6% (以无水物计）； 有关物质中杂质 A为 0.06%; 杂质 B为 0.11%; 任何未知单个杂质为 0.02%; 除 A和 B外其它 杂质总和为 0.05%; 丙酮残留为 80ppm。

一、 美罗培南结构确定：

美罗培南原料药物理性质测定结果为：

元素分析： C ₁₇ H ₂₅ N ₃ 0 ₅ S'3H ₂ 0

计算值： C, 46.67%; H, 7.14%; N, 9.60%; S, 7.33%;

实测值： C, 46.38%; H, 7.40%; N, 9.68%; S, 7.26%。

UV固 ² 。謹： 296

IR^^cm" ¹ : 1755, 1627, 1393, 1252, 1130.

ifi-NMR (D ₂ 0, δ/ppm): ： 1.21(3H, d, J=7.1 Hz), 1.29 ( 3H, d, J=6.3Hz ) 1.97(1H, m), 2.99(3H, s), 3.06(3H, s), 3.09 (1H, m), 3.38(1H, m), 3.46(2H, m), 3.77(1H, dd, J=11.9和 6.2Hz), 4.05(1H, m), 4.23(2H, m),4.82(lH)。

结论： 物理性质测定结果与美罗培南结构吻合。

二、 杂质研究过程

1、 初步分离鉴定：

首先利用液质联用系统对各个杂质进行了分离 和质谱测定， 参考美国 药典 USP32-NF27中美罗培南 （ Meropenem ) 项下的流动相， 釆用醋酸来 代替磷酸配制流动相， 二者图谱非常一致， 得到了各个杂质的分子量， 初 步确定了结构； 根据液相图谱， 杂质 A和杂质 B的相对保留时间（以美罗 培南的保留时间约 6min为基准） 分别为 0.5和 2.2。

2、 杂质的液相制备： 为了得到较多样品进行进一步验证， 参考初步分离鉴定中的流动相条 件， 利用制备液相色谱， 分离出杂质 A B, 反复多次制备， 得到所有杂 质的盐溶液， 杂质量达到毫克级。

3、 杂质的化学合成：

根据杂质的性质， 对杂质 A和 B进行了化学合成， 得到 lg杂质 A, 纯度 >95%； 杂质 B约 50毫克， 纯度 >90%

1 ) 杂质 A的合成：

按照 The Journal of Antibiotics Vol.46 No.5 P831 ~ P832所述方法制备 得到杂质 A, 经结构确认为杂质 A, 并与文献相符。

2 ) 杂质 B的合成：

按照 Chem. Pharm. Bull. 43(4) P690 (1995)所述方法制备得到杂质 B, 经结构确认为杂质 B, 并与文献相符。

4、 合成杂质八、 B与产品液相分离杂质 A B对比：

利用合成得到杂质 A B与产品液相分离杂质 A B对比， 首先对紫 外图谱进行了比较， 结果表明分别对应于 A B杂质； 为了进一步验证， 釆用加样法，将化学合成得到的杂质 A和 B分别定性加入实验得到的美罗 培南原料药中， 根据所得液相图谱中相应杂质峰面积增加的情 况， 进一步 判定产品中的杂质 A和 B与合成得到的 A B杂质完全一致。

5、 杂质 A B结构确认

1 ) 杂质 A物理性质测定结果为：

UV (λ ^mo ): ~ 275nm.

IR (KBr, cm" ¹ ): 3438.8, 2889.2, 2599.9, 1750.5, 1654.8, 1595.0, 1386.7, 1336.6, 1155.3, 781.1.

MS (m/z): 401.9 (M+l), 802.6 (2xM+l).

ifi-NMR (D ₂ 0, δ/ppm): 1.26 (t, J = 7.2, 1.5H, CH ₃ -CH-OH, A); 1.33 (t, J = 6.9, 3H, 1- -CH ₃ , A+A2); 1.49 (d, J = 6.6, 1.5H, CH ₃ -CH-OH, A2); 1.85 ~ 2.15 (m, CH-CH ₂ -CH, A2); 2.3 ~ 2.41 (m, CH ₃ -CH-CH, A2); 2.6 ~ 2.7 (m, S-CH-CH ₂ , A2); 2.8 ~ 3.1 (m, N-CH ₂ -CH, CH-CH-NH, A2); 3.03 (s, 3H, N-CH ₃ , A+A2); 3.1 (s, 3H, N-CH ₃ , A+A2); 3.35-3.45 (m, CH-CH ₂ -CH, A); 3.65 - 3.78 (m, CH ₃ -CH-CH, A); 3.8 ~ 4.0 (m, N-CH ₂ -CH, A, CH ₂ -CH-NH, A+A2); 4.1 ~ 4.3 (m, CH-CH-COOH, A+A2); 4.3 ~ 4.36 (dd, CH-CH-NH, A); 4.47 ~ 4.6 (m, CH ₃ -CH-OH, A+A2).

¹³ C-NMR (D ₂ 0, δ/ppm): 12.88, 15.55, 17.25, 18.21, 22.3, 23.0, 23.74, 37.76, 38.94, 39.77, 41.74, 44.21, 45.11, 45.6, 46.05, 49.36, 52.0, 54.16, 54.62, 55.15, 57.37, 60.23, 61.02, 62.57, 67.0, 71.73, 93.9, 100.48, 124.56, 170.43, 172.84, 174.25, 177.39, 180.82, 182.1.

结论： 物理性质测定结果与杂质 A结构吻合， 相关谱图见图 1-5 2 ) 杂质 B物理性质测定结果为：

υν (λ ^H20 ) _: 297

IR (KBr, cm" ¹ ): 3398.3, 2966.3, 2871.8, 1751.2, 1627.8, 1396.4, 1263.3, 1145.6, 781.1

MS (m/z): 767 (M+l) ₀

ifi-NMR δ/ppm (D ₂ 0): 1.03 (d, J = 7.2 Hz, 3H, CH ₃ -CH); 1.23 (d, J = 12.3 Hz, 3H, CH ₃ -CH); 1.26 (d, J = 7.5 Hz, 3H, CH ₃ -CH); 1.31 (d, J = 6.3 Hz, 3H, CH ₃ -CH); 1.68 ~ 1.82 (m, 2H, CH-CH ₂ -CH); 2.6 ~ 3.0 (m, 3H, CH-CH-CH); 2.95 (s, 6H, N-CH ₃ ); 3.04 (s, 3H, N-CH ₃ ); 3.18 (s, 3H, N-CH ₃ ); 3.05 - 3.3 (m, 2H, S-CH-CH ₂ ); 3.44 (d, 1H, S-CH-CH); 3.48 ~ 3.8 (m, 3H, CH ₂ , CH-CH-CH); 3.9 ~ 4.5 (m, 8H, HO-CH-CH ₃ , CH2); 4.7 ~ 4.85 (m, 1H, CO-CH-N); 5.05 (m, 1H, CO-CH-N)。

¹³ C-NMR δ/ppm (D ₂ 0): 176.9, 173.9, 173.6, 173.3, 169.4, 168.2, 140.4, 132.3, 115.5, 74.7, 73.7, 69.7, 65.9, 59.2, 58.4, 58.1, 57.7, 56.7, 52.8, 51.6, 50.7, 45.3, 43.4, 40.4, 38.0, 37.9, 37.5, 36.8, 34.8, 34.4, 20.9, 16.9, 15.6, 11.0 结论： 物理性质测定结果与杂质 B结构吻合， 相关谱图见图 6-9 实施例 2

将实施例 1得到的美罗培南精制母液 3 21.0kg,加入纳滤设备溶液罐； 控制纳滤设备出口压力 18 X 10 ⁵ Pa开始浓缩， 控制浓缩过程料液温度为 10 °C ~ 25 °C , 耗时 98分钟， 浓缩液从 21.0kg降低到 2.70kg, 得到浓缩废水 18.30kg, 取样浓缩废水检测美罗培南含量， 结果为未检出； 取浓缩液检测 美罗培南含量为 10%

将 2.70kg浓缩液加入到 152L的已析出粗品的过滤后母液（母液 2 ) 中， 控制温度 10 ~ 15 °C搅拌 30min; 经过滤、 洗晶、 干燥后得到 186g美 罗培南粗品； 取样检测美罗培南粗品杂质、 含量， 其中美罗培南的含量为 97.8%; 有关物质中杂质 A为 0.11%; 杂质 B为 0.38%; 任何未知单个杂 质为 0.12%; 除 A和 B外其它杂质总和为 1.0%

其中母液 2约含水 16%, THF为 84%; 制备方法参照实施例 13 实施例 3

将美罗培南粗品 20kg加入到 300kg温度为 20°C的注射用水中， 搅拌 混合均匀， 将混悬物通过换热器瞬间加热到 70°C溶解， 并通过换热器迅速 降到 20 °C , 得溶液 I

通过活性炭过滤器在线过滤脱色溶液 I, 得到滤液 II

放出 6.4kg的滤液 II, 设定温度为 5 °C , 加入 25.6L四氢呋喃， 搅拌 20分钟后过滤得到晶种。 降温至 0°C， 将制得的晶种加入剩余的 288kg滤 液 II中， 保持搅拌速度为 120转 /分钟， 养晶 10小时， 过滤， 得到母液 3 , 母液 3进入下一步纳滤浓缩。

滤饼用丙酮淋洗， 滤饼真空 25°C干燥 6小时， 粉碎， 得到美罗培南原 料药 14kg, 收率 70%

其中美罗培南的含量为 99.7% (以无水物计）； 有关物质中杂质 A为 0.04%; 杂质 B为 0.09%; 任何未知单个杂质为 0.03%; 除 A和 B外其它 杂质总和为 0.05%; 丙酮残留为 20ppm

美罗培南原料药物理性质测定结果为：

元素分析： C ₁₇ H ₂₅ N ₃ 0 ₅ S'3H ₂ 0

计算值： C, 46.67%; H, 7.14%; N, 9.60%; S, 7.33%;

实测值： C, 46.40%; H, 7.38%; N, 9.66%; S, 7.28%

UV ² 。謹： 296

IR^^cm" ¹ : 1755, 1627, 1393, 1252, 1130.

ifi-NMR (D ₂ 0, δ/ppm): ： 1.21(3H, d, J=7.1 Hz), 1.29 ( 3H, d, J=6.3Hz ) 1.97(1H, m), 2.99(3H, s), 3.06(3H, s), 3.09 (1H, m), 3.38(1H, m), 3.46(2H, m), 3.77(1H, dd, J=11.9和 6.2Hz), 4.05(1H, m), 4.23(2H, m),4.82(lH)

杂质 A B按照实施例 1所述方法分析、 测定， 结果符合。 实施例 4

将实施例 3得到的美罗培南精制母液 3 340kg, 加入纳滤设备溶液罐； 控制纳滤设备出口压强 20 X 10 ⁵ Pa开始浓缩， 控制浓缩过程料液温度为 5 °C ~ 35.0°C , 浓缩液从 340kg降低到 42kg, 得到浓缩废水 298kg, 取样浓 缩废水检测美罗培南含量， 结果为未检出； 取浓缩液检测美罗培南含量为 9%

将 42kg浓缩液加入到 398L已析出粗品的过滤后母液（母液 2 ) 中， 控制温度 5 °C搅拌 60min; 通过过滤器过滤、 洗晶、 干燥后得到 3.06kg美 罗培南粗品； 取样检测美罗培南粗品杂质、 含量， 其中美罗培南的含量为 98.0%; 有关物质中杂质 A为 0.20%; 杂质 B为 0.18%; 任何未知单个杂 质为 0.13%; 除 A和 B外其它杂质总和为 1.0%

其中母液 2约含水 14%, THF+丙酮为 86%; 制备方法参照实施例 13 实施例 5

将实施例 4得到的美罗培南粗品 1kg加入到 17kg温度为 5 °C的注射用 水中， 搅拌混合均勾， 将混悬物通过换热器瞬间加热到 60°C溶解， 并通过 换热器迅速降到 10°C , 得溶液 I

通过活性炭过滤器在线过滤脱色溶液 I, 得到滤液 II

放出 1.8kg的滤液 II, 设定温度为 20°C , 加入 10.8L丙酮， 搅拌 15 分钟后过滤得到晶种。 降温至 5 °C , 将制得的晶种加入剩余的 16.2kg滤液 II中， 保持搅拌速度为 110转 /分钟， 养晶 5小时， 过滤， 得到母液 3 , 母 液 3进入下一步纳滤浓缩。

滤饼用丙酮淋洗， 滤饼真空 20°C干燥 10小时， 粉碎， 得到美罗培南 原料药 690g, 收率 69%

其中美罗培南的含量为 99.8% (以无水物计）； 有关物质中杂质 A为 0.05%; 杂质 B为 0.07%; 任何未知单个杂质为 0.03%; 除 A和 B外其它 杂质总和为 0.08%; 丙酮残留未检出。

美罗培南原料药物理性质测定结果为：

元素分析： C ₁₇ H ₂₅ N ₃ 0 ₅ S'3H ₂ 0

计算值： C, 46.67%; H, 7.14%; N, 9.60%; S, 7.33%;

实测值： C, 46.43%; H, 7.32%; N, 9.56%; S, 7.38%

UV ² 。謹： 296

IR^^cm" ¹ : 1755, 1627, 1393, 1252, 1130.

ifi-NMR (D ₂ 0, δ/ppm): ： 1.21(3H, d, J=7.1 Hz), 1.29 ( 3H, d, J=6.3Hz ) 1.97(1H, m), 2.99(3H, s), 3.06(3H, s), 3.09 (1H, m), 3.38(1H, m), 3.46(2H, m), 3.77(1H, dd, J=11.9和 6.2Hz), 4.05(1H, m), 4.23(2H, m),4.82(lH)

杂质 A B依照实施例 1所述方法分析、 测定， 结果符合。 实施例 6

将实施例 5得到的美罗培南精制母液 3 18.8kg,加入纳滤设备溶液罐， 控制纳滤设备出口压力 5 X 10 ⁵ Pa开始浓缩， 控制浓缩过程料液温度为 10 °C ~ 30°C , 浓缩液从 18.8kg降低到 3.76kg, 得到浓缩废水 15kg, 取样浓 缩废水检测美罗培南含量， 结果为未检出； 取浓缩液检测美罗培南含量为 5%

将 3.76kg浓缩液加入到 30L的已析出粗品的过滤后母液（母液 2 )中， 控制温度 5 ~ 10°C搅拌 30min; 经过滤、 洗晶、 干燥后得到 148.6g美罗培 南粗品； 取样检测美罗培南粗品杂质、 含量， 结果合格。

其中母液 2约含水 15%, THF+曱基乙基酮为 85%; 制备方法参照实 施例 13 实施例 7

将美罗培南粗品 30kg加入到 600kg温度为 10°C的注射用水中， 搅拌 混合均匀， 将混悬物通过换热器瞬间加热到 65 °C溶解， 并通过换热器迅速 降到 15 °C , 得溶液 I

通过活性炭过滤器在线过滤脱色溶液 I, 得到滤液 II

放出 9.5kg的滤液 II, 设定温度为 5 °C , 加入 28.5L四氢呋喃， 搅拌 20分钟后过滤得到晶种。 降温至 0°C , 将制得的晶种加入剩余的 620.5kg 滤液 I中，保持搅拌速度为 120转 /分钟，养晶 10小时，过滤，得到母液 3 , 母液 3进入下一步纳滤浓缩。

滤饼用丙酮淋洗， 滤饼真空 25°C干燥 6小时， 粉碎， 得到美罗培南原 料药 21kg, 收率 70%

其中美罗培南的含量为 99.7% (以无水物计）； 有关物质中杂质 A为 0.05%; 杂质 B为 0.06%; 任何未知单个杂质为 0.02%; 除 A和 B外其它 杂质总和为 0.06%; 丙酮残留为 60ppm

美罗培南原料药物理性质测定结果为：

元素分析： C ₁₇ H ₂₅ N ₃ 0 ₅ S'3H ₂ 0

计算值： C, 46.67%; H, 7.14%; N, 9.60%; S, 7.33%;

实测值： C, 46.45%; H, 7.22%; N, 9.54%; S, 7.39%

UV ² 。謹： 296

IR^^cm" ¹ : 1755, 1627, 1393, 1252, 1130.

ifi-NMR (D ₂ 0, δ/ppm): ： 1.21(3H, d, J=7.1 Hz), 1.29 ( 3H, d, J=6.3Hz ) 1.97(1H, m), 2.99(3H, s), 3.06(3H, s), 3.09 (1H, m), 3.38(1H, m), 3.46(2H, m), 3.77(1H, dd, J=11.9和 6.2Hz), 4.05(1H, m), 4.23(2H, m),4.82(lH)。 杂质 A、 B依照实施例 1所述方法分析、 测定， 结果符合。 实施例 8

将实施例 7得到的美罗培南精制母液 3 600kg, 加入纳滤设备溶液罐, 控制纳滤设备出口压力 20 X 10 ⁵ Pa开始浓缩， 控制浓缩过程料液温度为 10 °C ~ 25 °C , 浓缩到 51kg, 得到浓缩废水 542L, 取样浓缩废水检测美罗培 南含量， 结果为未检出； 取浓缩液检测美罗培南含量为 15%。

将 51kg浓缩液加入到装有 1700L未析出粗品的过滤后母液（母液 1 ) 的粗品结晶罐中， 一同执行粗品生产， 加入 2120L四氢呋喃结晶， 控制温 度 5 ~ 10°C搅拌 30min;经过滤、洗晶、干燥后得到 24.05kg美罗培南粗品； 取样检测美罗培南粗品杂质、 含量， 其中美罗培南的含量为 98.4%; 有关 物质中杂质 A为 0.24%; 杂质 B为 0.14%; 任何未知单个杂质为 0.10%; 除 A和 B外其它杂质总和为 0.58%。

其中母液 1的制备方法参照实施例 13。 实施例 9

将美罗培南粗品 60kg加入到 600kg温度为 20°C的注射用水中， 搅拌 混合均匀， 将混悬物通过换热器瞬间加热到 50°C溶解， 并通过换热器迅速 降到 10°C , 得溶液 I。

通过活性炭过滤器在线过滤脱色溶液 I, 得到滤液 II。

降温至 5 °C , 加入 3kg晶种， 保持搅拌速度为 110转 /分钟， 养晶 20 小时， 过滤， 得到母液 3 , 母液 3进入下一步纳滤浓缩。

滤饼用丙酮淋洗， 滤饼真空 25°C干燥 6小时， 粉碎， 得到美罗培南原 料药 41.4kg, 收率 69%。

其中美罗培南的含量为 99.5% (以无水物计）； 有关物质中杂质 A为 0.07%; 杂质 B为 0.09%; 任何未知单个杂质为 0.02%; 除 A和 B外其它 杂质总和为 0.06%; 丙酮残留为 50ppm。

美罗培南原料药物理性质测定结果显示与美罗 培南结构相符。

杂质 A、 B依照实施例 1所述方法分析、 测定， 结果符合。 实施例 10

将实施例 9得到的美罗培南精制母液 3 600kg, 加入纳滤设备溶液罐， 控制纳滤设备出口压力 20 X 10 ⁵ Pa开始浓缩， 控制浓缩过程料液温度为 10 °C ~ 25 °C , 浓缩到 40kg, 得到浓缩废水 560L, 取样浓缩废水检测美罗培 南含量， 结果为未检出； 取浓缩液检测美罗培南含量为 20%。

将 40kg浓缩液加入到装有 1700L未析出粗品的过滤后母液（母液 1 ) 的粗品结晶罐中，一同执行粗品生产，加入 3560L丙酮结晶，控制温度 5 ~ 10°C搅拌 30min; 经过滤、 洗晶、 干燥后得到 29.6kg美罗培南粗品； 取样 检测美罗培南粗品杂质、 含量， 其中美罗培南的含量为 98.2%; 有关物质 中杂质 A为 0.28%; 杂质 B为 0.30%; 任何未知单个杂质为 0.11%; 除 A 和 B外其它杂质总和为 0.64%。

其中母液 1的制备方法参照实施例 13。 实施例 11

将实施例 10得到的美罗培南粗品 1kg加入到 13kg温度为 70°C的注射 用水中， 2分钟内搅拌溶解， 并在 4分钟内迅速降到 25 °C。

加入 10g医用活性炭脱色 5分钟， 过滤， 得到滤液 II。

降温至 2°C , 加入 20g晶种， 保持搅拌速度为 100转 /分钟， 养晶 7小 时， 过滤， 母液进入下一步纳滤浓缩。

滤饼用丙酮淋洗， 滤饼真空 25°C干燥 6小时， 粉碎， 得到美罗培南原 料药 670g, 收率 67%。

其中美罗培南的含量为 99.4% (以无水物计）； 有关物质中杂质 A为 0.08%; 杂质 B为 0.13%; 任何未知单个杂质为 0.03%; 除 A和 B外其它 杂质总和为 0.07%; 丙酮残留为 10ppm。

美罗培南原料药物理性质测定结果显示与美罗 培南结构相符。

杂质 A、 B依照实施例 1所述方法分析、 测定， 结果符合。 实施例 12

将实施例 11得到的美罗培南精制母液 3 13kg, 加入纳滤设备溶液罐， 控制纳滤设备出口压力 15 x l0 ⁵ Pa; 开始浓缩， 控制浓缩过程料液温度为 10°C ~ 25 °C , 浓缩到 1.85kg, 得到浓缩废水 11.15kg, 取样浓缩废水检测 美罗培南含量， 结果为未检出； 取浓缩液检测美罗培南含量为 7%。

将 1.85kg浓缩液加入到装有 1700L未析出粗品的过滤后母液（母液 1 ) 的粗品结晶罐中，一同执行粗品生产，加入 2625L曱醇结晶，控制温度 5 ~ 10°C搅拌 30min; 经过滤、 洗晶、 干燥后得到 19.7kg美罗培南粗品； 取样 检测美罗培南粗品杂质、 含量， 结果合格。 其中母液 1由实施例 13制备得到 实施例 13

将保护美罗培南 (I _a )33.0kg (或者保护美罗培南 HLPC含量为 33.0kg 的浓缩液）、 THF 880L、水 700L、 3,5,-二曱基吡啶 14.5kg、 10%钯碳 5.28kg 一并加入到 2000L的高压反应釜中， 除去空气， 通入氢气， 室温反应 6小 时， 反应毕， 过滤洗涤回收钯碳， 得到 1700L未析出粗品的过滤后母液， 其中 THF约 880L, 水约 700L, 其他约 120L; 此母液可作为未析出粗品 的过滤后母液用， 简称母液 1 ;

此母液中加入 2625L四氢呋喃， 控制温度 10-15 °C搅拌 30min, 过滤， 洗涤， 产品干燥， 得美罗培南 （化合物 I )粗品 19.5kg, 质量收率 59%; 其中美罗培南的含量为 97.8%; 有关物质中杂质 A为 0.20%; 杂质 B为 0.40%; 任何未知单个杂质为 0.13%; 除 A和 B外其它杂质总和为 1.2%。

得到已析出粗品的过滤后母液 4300L, 其中含水约 700L, THF 约 3600L; 即约含水 16%, THF为 84%, 此母液可作为已析出粗品的过滤后 母液用， 简称母液 2。

其中 2625L四氢呋喃中的四氢呋喃可换成丙酮、异丙� ��、 曱醇、 乙醇、 曱基乙基酮的一种或多种； 母液 2 中有机溶剂体积之和与水的体积比为 3: 1 ~ 6: 1即可。

其中 2625L四氢呋喃中的四氢呋喃可换成丙酮、异丙� ��、曱醇、 乙醇、 曱基乙基酮的一种或多种， 也可制备得到质量合格的美罗培南粗品。 实施例 14

将按照实施例 1所述方法制备得到的 500g无菌美罗培南原料药、104g 无菌碳酸钠粉碎， 检测符合无菌及粒度要求， 釆用高效混合机混合均匀， 将包装容器进行无菌处理， 灌装， 按照美国药典 USP32-NF27注射用美罗 培南项下方法检测合格， 包装入库。 实施例 15

将按照实施例 Ί 所述方法制备得到的 1000g 无菌美罗培南原料药、 222g无菌碳酸钠粉碎，检测符合无菌及粒度要� �， 釆用高效混合机混合均 匀， 将包装容器进行无菌处理， 灌装， 按照美国药典 USP32-NF27注射用 美罗培南项下方法检测合格， 包装入库。 实施例 16

将按照实施例 9 所述方法制备得到的 2000g 无菌美罗培南原料药、 390g无菌碳酸钠粉碎，检测符合无菌及粒度要� �， 釆用高效混合机混合均 匀， 将包装容器进行无菌处理， 灌装， 按照美国药典 USP32-NF27注射用 美罗培南项下方法检测合格， 包装入库。 对比实施例 1

将 5g美罗培南粗品于 30 °C溶于 50ml水中 ,水浴冷却，析出少量晶体， 加入 250ml丙酮， 搅拌一' 时， 过滤得到晶体， 用 90ml丙酮洗涤， 减压 室温干燥二小时得到约 4.7g美罗培南三水合物晶体。

其中美罗培南的含量为 98.4% (以无水物计）； 有关物质中杂质 A为 0.19%; 杂质 B为 0.27%; 任何未知单个杂质为 0.10%; 除 A和 B外其它 杂质总和为 0.26%; 丙酮残留为 599ppm。

按照实施例 14 所述方法制备其美罗培南原料药与碳酸钠的重 量比为

1000:208的药物组合物。 对比实施例 2

将美罗培南粗品 200克溶解于 20L温度 20 °C的水中，形成溶液，将活 性炭 10克加入该溶液中， 并搅拌溶液约一小时。 经过滤除去活性炭后， 用水冲洗过滤液， 形成水溶液， 再由操作压力每平方英寸 120磅及操作温 度 10 °C至 20 °C的逆渗透浓缩装置浓缩该水溶液， 生成 6.7L浓缩体。 浓缩 体冷却到 0 °C至 10 °C , 添加 1克晶种至浓缩体， 稍后添加 20.1L温度 0 °C 至 10 °C的四氢呋喃作为浓缩体的溶剂， 然后经 6小时搅拌， 搅拌至温度为 0 °C至 5 °C , 收集沉淀的晶体， 并由丙酮冲洗以及经 3小时 30 °C的干燥， 得到美罗培南原料药 165g。

按照中国药典 2010年版二部检测，其中美罗培南的含量为 98.9% (以 无水物计）； 有关物质中主峰前和后的最大杂质分别为 0.13%、 0.23% , 其 他单个杂质 0.08%; 各杂质总和 0.52%, THF有机残留 998ppm。 按照实施例 14 所述方法制备其美罗培南原料药与碳酸钠的重 量比为

1000:208的药物组合物。 稳定性试验

下面通过稳定性考察结果来说明本发明所提供 的原料药及制剂的有 益效果。

1. 美罗培南原料药加速试验稳定性考察

包装： 铝桶； 存储条件： 温度 40。C±2。C , 湿度 75% RH±5% RH 美罗培南原料药 1 ~ 6个月加速试验稳定性考察结果见表 1。

表 1. 美罗培南原料药加速试验稳定性结果

项目 指标 0-月 1-月 2-月 3-月 4-月 5-月 6-月 实施例 1样品有关物质

杂质 A < 0.25% 0.06% 0.12% 0.12% 0.14% 0.14% 0.15% 0.15% 杂质 B < 0.25% 0.11% 0.08% 0.05% 0.06% 0.06% 0.06% 0.04% 任何未知单个杂质： < 0.05% 0.02% 0.03% 0.04% 0.02% 0.03% 0.03% 0.02% 除 A和 B外其它杂质总和： < 0.2% 0.05% 0.05% 0.10% 0.09% 0.08% 0.11% 0.06% 实施例 1样品 与 5号标准

溶液颜色 比色液比较 < Y5 < Υ5 < Υ5 < Υ5 < Υ5 < Υ5 =Υ4 不得更深

实施例 3样品有关物质

杂质 A < 0.25% 0.04% 0.13% 0.15% 0.14% 0.14% 0.16% 0.15% 杂质 B < 0.25% 0.09% 0.08% 0.08% 0.06% 0.06% 0.06% 0.04% 任何未知单个杂质： < 0.05% 0.03% 0.03% 0.02% 0.02% 0.03% 0.03% 0.02% 除 A和 B外其它杂质总和： < 0.2% 0.05% 0.05% 0.08% 0.09% 0.08% 0.11% 0.07% 实施例 3样品 与 5号标准

溶液颜色 比色液比较 < Υ5 < Υ5 < Υ5 < Υ5 < Υ5 < Υ5 =Υ4 不得更深

实施例 7样品有关物质

杂质 A < 0.25% 0.05% 0.12% 0.13% 0.11% 0.13% 0.16% 0.15% 杂质 B < 0.25% 0.06% 0.08% 0.08% 0.05% 0.05% 0.06% 0.04% 任何未知单个杂质： < 0.05% 0.02% 0.03% 0.02% 0.01% 0.02% 0.02% 0.02% 除 A和 B外其它杂质总和： < 0.2% 0.06% 0.06% 0.07% 0.07% 0.08% 0.11% 0.06% 实施例 7样品 与 5号标准

溶液颜色 比色液比较 < Υ5 < Υ5 < Υ5 < Υ5 < Υ5 < Υ5 Υ4-Υ5 不得更深

对比实施例 1有关物质 USP32-NF2

杂质 A 7 0.19%

0.19% 0.20% 0.21% 0.21% 0.21% 0.23% 杂质 B < 0.3% 0.27%

0.27% 0.28% 0.29% 0.29% 0.30% 0.32% 任何未知单个杂质： < 0.3% 0.10%

0.12% 0.12% 0.14% 0.15% 0.14% 0.15% 除 A和 B外其它杂质总和： < 0.1% 0.26%

0.27% 0.26% 0.28% 0.29% 0.31% 0.33%

< 0.3% 对比实施例 1样品 与 5号标准

溶液颜色 比色液比较 Y2-Y3 Y4-Y5 Y4-Y5 Y4-Y5 = Y5 = Y5 >Y5 不得更深

对比实施例 2有关物质 (中国药典

主峰前最大杂质 2010版）

0.13% 0.15% 0.16% 0.16% 0.17% 0.18% 0.18% 主峰后最大杂质 <0.3%

0.23% 0.23% 0.24% 0.26% 0.27% 0.28% 0.31% 其他单个杂质 <0.3%

0.08% 0.12% 0.15% 0.13% 0.15% 0.14% 0.16% 各杂质总和 <0.1%

0.52% 0.55% 0.61% 0.64% 0.68% 0.71% 0.80%

<1.0%

对比实施例 2样品 与 5号标准

溶液颜色 比色液比较 = Y3 = Y5 Y4-Y5 Y4-Y5 = Y5 = Y5 >Υ5 不得更深

由结果可知， 对比实施例 1、 2 中杂质含量高， 丙酮或四氢呋喃有机 残留高的美罗培南原料药在温度 40。C±2。C、 湿度 75% RH±5% RH加速试 验条件下放置 6个月， 有关物质、 溶液颜色均不符合要求， 稳定性试验不 合格， 无法保证长期存放后的用药安全； 而本发明提供的原料药， 以上市 包装在加速试验条件下杂质、 溶液颜色仍然符合规定， 稳定性很好， 能够 保证产品有效、 安全， 所以作为原料药制备注射剂用于静脉给药安全 性更 高， 疗效更好。

本发明提供的美罗培南原料药的其他检测项， 如比旋度、 酸度、 澄清 度、 细菌内毒素、 无菌、 水分、 可见异物、 不溶性微粒、 有机残留、 炽灼 残渣、 重金属、 结晶水、 无水含量等加速试验稳定性结果也符合要求。

本发明其他实施例提供的美罗培南原料药上述 各项指标加速试验稳 定性结果也同样符合要求。

2. 美罗培南原料药长期试验稳定性考察

包装： 铝桶； 存储条件： 温度 25。C±2。C , 湿度 60% RH±5% RH 美罗培南原料药 1 ~ 24个月长期试验稳定性考察结果见表 2。

表 2. 美罗培南原料药长期试验稳定性结果

项目 指标 0-月 3-月 6-月 9-月 12-月 18-月 24-月 实施例 1样品有关物质

杂质 A < 0.25% 0.06% 0.08% 0.12% 0.13% 0.14% 0.14% 0.15% 杂质 B < 0.25% 0.11% 0.06% 0.07% 0.06% 0.06% 0.07% 0.08% 任何未知单个杂质： < 0.05% 0.02% 0.03% 0.02% 0.02% 0.03% 0.03% 0.04% 除 A和 B外其它杂质总和： < 0.2% 0.05% 0.07% 0.08% 0.08% 0.08% 0.10% 0.11% 实施例 3样品有关物质

杂质 A < 0.25% 0.04% 0.08% 0.11% 0.12% 0.13% 0.14% 0.15% 杂质 B < 0.25% 0.09% 0.08% 0.08% 0.06% 0.06% 0.08% 0.09% 任何未知单个杂质： < 0.05% 0.03% 0.03% 0.02% 0.02% 0.03% 0.03% 0.02% 除 A和 B外其它杂质总和： < 0.2% 0.05% 0.07% 0.07% 0.09% 0.08% 0.11% 0.07% 实施例 7样品有关物质

杂质 A < 0.25% 0.05% 0.09% 0.11% 0.11% 0.12% 0.14% 0.14% 杂质 B < 0.25% 0.06% 0.08% 0.08% 0.05% 0.05% 0.06% 0.04% 任何未知单个杂质： < 0.05% 0.02% 0.03% 0.02% 0.01% 0.02% 0.02% 0.03% 除 A和 B外其它杂质总和： < 0.2% 0.06% 0.09% 0.07% 0.07% 0.08% 0.09% 0.06% 由结果可知， 以上市包装在温度 25。C±2。C、 湿度 60% RH±5% RH长 期试验条件下放置 24个月， 杂质仍然符合规定， 稳定性很好,所以作为原 料药制备注射剂用于静脉给药安全性更高， 疗效更好。

本发明提供的美罗培南原料药的其他检测项， 如比旋度、 酸度、 澄清 度、 颜色、 细菌内毒素、 无菌、 水分、 可见异物、 不溶性微粒、 有机残留、 炽灼残渣、重金属、 结晶水、无水含量等长期试验稳定性结果也符 合要求。

本发明其他实施例提供的美罗培南原料药上述 各项指标长期试验稳 定性结果也同样符合要求。

3. 注射用美罗培南药物组合物长期试验稳定性考 察

存储条件： 温度 25。C±2。C, 湿度 60% RH士 5% RH

注射用美罗培南药物组合物 1 ~ 36个月长期试验稳定性考察结果见表 表 3. 注射用美罗培南药物组合物长期试验稳定性结 果

由结果可知， 对比实施例 1、 2 中杂质含量高， 丙酮或四氢呋喃有机 残留高的美罗培南原料药制备的组合物在温度 25。C±2。C、 湿度 60% RH±5% RH长期试验条件下放置 24个月及 36个月，溶液颜色不符合要求， 稳定性试验不合格， 无法保证长期存放后的用药安全； 而本发明提供的注 射用美罗培南药物组合物在长期试验条件下溶 液颜色仍然符合规定， 稳定 性很好， 作为注射剂用于静脉给药安全性更高， 疗效更好。

本发明提供的注射用美罗培南药物组合物的其 他检测项， 如性状、 鉴 别、 碱度、 澄清度、 有关物质、 干燥失重、 含量均匀度、 细菌内毒素、 无 菌、可见异物、 不溶性微粒、含量测定等长期试验稳定性结果 也符合要求， 所以能够保证产品有效、 安全。